潔凈室檢測-潔凈度沉降菌測試

潔凈室檢測-潔凈度沉降菌測試 采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物性粒子于培養基平皿，經若干時間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進行計數，以平板培養皿中的菌落數來判定潔凈環境內的活微生物數，并以此來評定潔凈室(區)的潔凈度，本方法采用。GB/T 16294-2010《醫藥工業潔凈室(區)沉降菌的測試方法》進行。

潔凈室檢測-潔凈度沉降菌測試 測試狀態

1、沉降菌測試前被測試潔凈室已經過消毒。

2、測試狀態有靜態和動態兩種，測試狀態的選擇必須符合生產的要求，并在報告中（原始記錄）中注明測試狀態。

3 測試人員

3.1 測試人員必須穿戴符合環境潔凈度級別的工作服。

3.2 靜態測試時，室內測試人員不得多于2人。

4 培養基

4.1 培養基用大豆酪蛋白瓊脂培養基或沙氏培養基。

4.2 培養皿一般采用 Ф90mm×15mm規格的培養皿。測試前培養皿表面必須嚴格消毒。

4.3 將培養基按要求配制加熱熔化后，分裝、滅菌。冷卻至60℃時，在無菌操作要求下傾注約20ml至無菌平皿中。加蓋后在室溫放至凝固。

4.4 制備好的培養基平皿在 2～8 ℃保存，一般以一周為宜。

5 測試時間

測試應在凈化空調系統正常運行不少于30min以后開始。

6 測試點和記錄

6.1 測試點按附錄《沉降菌測試點分布圖》。

6.2 測試點（采樣點）的位置離地面 0.8米左右（略高于工作面）。

6.3 在測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度、測試狀態。

6.4 用計數方法得出各個培養皿的菌落數。

6.5不同面積的最少采樣點數目見表1

最少培養皿數：在滿足最少采樣點數目的同時，還應滿足最少培養皿數，見表2

                                 表2

4.6.7采樣次數：每個采樣點一般采樣一次

7 平均菌落數的計算：

M=(M1+M2+M3)/N

平均菌落數   … (1)

式中： M代表平均菌落數

M_n代表n號培養皿的菌落數

N代表培養皿總數

8 測試步驟8.1 將已制備好的培養皿按采樣點布置圖逐個放置，然后從里到外逐個打開培養皿蓋，使培養基表面暴露在空氣中。靜態測試時，培養皿暴露時間為30min以上，動態測試時培養皿暴露時間為30min。

8.2 采樣結束后，將培養皿倒置于恒溫培養箱中培養。

8.3 培養不同類型培養基的培養溫度及時間見下表：

8.4 每批培養基應有對照試驗，檢驗培養基本身是否污染，可每批選定3只培養皿作對照培養。

8.5 用肉眼對培養皿上所有的菌落直接計數，標記或在菌落計數器上點計，然后用5-10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數。

9 測試要點

9.1 測試用具要作滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。

9.2 采取一切措施防止人為對樣本的污染。

9.3 由于細菌種類繁多，差別甚大，計數時一般用投射光于平皿背面或正面仔細觀察不要漏計培養皿邊緣生長的菌落，并須注意細菌菌落與培養基沉淀物區別，必要時用顯微鏡鑒別。

9.4 采樣前應仔細檢查每個培養皿的質量，如發現變質、破損或污染的應剔除。

9.5對培養基、培養條件及其他參數作詳細的記錄。

10、記錄測試報告應包括以下內容：

1、測試者的名稱和地址，測試日期。

2、測試依據。

3、被測潔凈室的平面位置

4、有關測試儀器及其測試方法的描述：包括測試環境條件，采樣點數目及布置圖，測試次數，或可能存在的測試方法的變更，測試儀器的檢定證書等，若為動態測試，則還應記錄現場操作人員數量及位置，現場設備運轉數量及位置。

5、測試結果：包括所有統計計算資料。

11、結果評定：

1、每個測點的沉降菌平均菌落數必須低于所選定評定標準中的界限。

2、在靜態測試時，若某測點的沉降菌平均菌落數超過評定標準，則應重新采樣兩次，兩次測試結果均合格才能判為符合。